Materi Isolasi DNA dan Elektroforesis
Materi Praktikum Isolasi DNA Praktikum Biomolekul Jurusan Kimia 1.1 Peremajaan isolat bakteri xilanolitik Proses peremajaan bakteri dimulai dari mengambil biakan isolat dari kultur sebelumnya. Isolat diambil dengan menggunakan kawat ose. Lalu kawat yang mengandung biakan ini digoreskan pada media padat yang baru. Selanjutnya biakan diinkubasi pada oven dengan suhu 37 0 C selama 18 jam. 1.2 Isolasi plasmid pET30 dari E. coli BL21 Koloni tunggal transforman E. Coli diinokulasi ke dalam 5 ml media Luria Bertani cair yang mengandung 2,5 µl kanamisin 100 mg/ml dan diinkubasi pada shaker incubator pada 37 °C dengan kecepatan 150 rpm selama 18 jam. Setelah 18 jam, inokulum disentrifugasi selama 2 menit dengan kecepatan 10.000 rpm pada suhu 4 °C . P ellet dilarutkan dalam larutan I (Glukosa 50 mM, Tris-HCl 2,5 mM pH 8, Na 2 EDTA 10 mM pH 8) 100 µL dan dihomogenkan lalu didiamkan 5 menit. Ditambahkan 200 µL larutan II (NaOH 0,2 M, SDS 1%, ddH 2 O steril) dan dih...
